产品货号:
BTN101116
中文名称:
植物油DNA提取试剂盒(沉淀法)
英文名称:
Vegetable oil DNA column extraction kit
产品规格:
5次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是专门用于从植物油中提取痕量DNA的试剂盒,适用于各种植物油,如大豆油、菜籽油、葵花籽油及各种调和油,所得DNA可以用于转基因检测。
由于精制食用植物油生产过程中有高温高压过程,因此DNA破坏严重。同时DNA在植物油中的溶解度非常小,因此残留DNA浓度非常低,一般在0.1~0.5pg/mL范围,要提取到这些痕量的DNA非常困难。为了解决这一难题,专门开发出了本制品。
- 本制品纯化得到的植物油DNA为痕量,不能电泳检测,不能测OD(低于检测极限),只能用PCR检测。
- 沉淀法,DNA回收率高达90%。
- 操作简单,提取过程一般只需要30分钟。
组分 | 规格 |
植物油DNA纯化溶液A | 250mL |
植物油DNA纯化溶液B | 500μL |
植物油DNA纯化溶液C | 250mL |
Tris饱和PCI混合液(pH7.5,25:24:1) | 250mL |
微量核酸沉淀剂 | 250mL×2 |
DNA洗脱液 | 10mL |
保存:室温,其中溶液B需放-20℃保存,有效期1年。
本试剂盒足够5次植物油DNA提取,每次50mL植物油,如果按0.1~0.5pg/mL的浓度,可提出约5~25pg的植物油DNA。
异丙醇、75%乙醇。
- 在一个250mL的塑料烧杯或塑料三角瓶中,加入50mL植物油样品、50mL植物油DNA纯化溶液A和100μL植物油DNA纯化溶液B,磁力搅拌2~4小时。
- 只能用塑料烧杯,不能用玻璃烧杯,因为玻璃会吸附DNA。
- 加入50mL植物油DNA纯化溶液C,继续磁力搅拌3小时。此时溶液体积为150mL。
- 将150mL混合液平均分到4个50mL离心管中(每管大约37mL),8000rpm离心5分钟。管中液体将分为上层的油相和下层的水相(水相大约有12mL)。
- 用移液枪直接取下层水相到新的离心管中,加入等体积的Tris饱和PCI混合液(pH7.5,25:24:1),震荡混匀。
- 8000rpm离心5分钟,管中液体将分为上层的水相和下层的有机相。小心取水相到一新的离心管中。
- 各加入2倍体积的微量核酸沉淀剂(12mL液体需要加24mL微量核酸沉淀剂),颠倒混匀后,12000rpm离心30分钟。
- 弃上清液,保留沉淀(含植物油DNA)。
- 再离心1分钟,弃管中残留液体。
- 各用100μL DNA洗脱液溶解沉淀,最后将400μL(每管100μL,共4管)DNA溶液汇集到1各个1.5mL的离心管中。
- 加等体积(400μL)的Tris饱和PCI混合液(pH7.5,25:24:1),充分震荡3分钟。
- 8000rpm离心5分钟,管中液体将分为上层的水相和下层的有机相。小心取水相到一新的离心管中。
- 加入2倍体积(800μL)微量核酸沉淀剂,颠倒10次混匀后,13000rpm离心15分钟,小心弃上清。
- 加入自备的75%乙醇,13000rpm离心5分钟。
- 小心弃上清。
- 再离心1分钟,吸弃管中残留液体。
- 加入50μL DNA洗脱液,溶解DNA沉淀,待用。由于50mL植物油按0.1~0.5pg/mL的浓度计算,最多可提出约5~25pg的DNA,故只能PCR检测回收效果,不能电泳和测OD。
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